生存素在子宫内膜异位症患者异位病灶中的表达情况

　　摘要

　　目的：了解生存素在子宫内膜异位症患者异位病灶中的表达情况。方法：采用免疫组化抗生物素蛋白一过氧化物酶染色法(sP法)检测38例2002年12月至2004年9月在妇科住院的未治疗的子宫内膜异位症患者的40个异位内膜标本中生存素的表达及其与CA125的关系。结果：生存素在异位内膜中广泛表达，表达的强度与病灶部位无关，与分期相关(P=0. 001)，与CA125无明显相关性(P=0.840)。结论：未经治疗的子宫内膜异位症患者的病灶中有生存素的表达，表达强度与期别的高低有关，可能与发病机制相关。

　　关键词：子宫内膜异位症　生存素 免疫组织化学法

　　子宫内膜异位症(EMs)被称为“有着恶性肿瘤行为的良性疾病”，是严重影响许多妇女生存质量的常见疾病之一。10% N15%的生育期妇女患有EMs。其病因学说众多，以经血逆流种植学说最为被广泛接受。然而逆流经血中的内膜成功种植的前提是内膜细胞是活的。有学者发现EMs患者分泌晚期子宫内膜的凋亡率不及正常人的1/5。而异位到腹腔的内膜细胞也需避过免疫细胞的袭击并存活才能成为病灶。本研究通过了解异位内膜组织中的抗凋亡蛋白(IAP)生存素( survivin)的表达，探讨IAP在EMs发病中的作用。Survivin是1997年才被发现的凋亡抑制蛋白家族的新成员^[1]。近年来由于其在细胞抗凋亡及独特的细胞周期调节的作用成为肿瘤学的研究热点。

　　1 资料与方法

　　1.1 资料来源

　　所有研究样本均来自暨南大学第二附属医院上饶市医院妇产科2002年12月至2004年9月间因EMs行手术的患者，共38例，术前3个月未服用激素类药物，平均年龄(36.4±8.1)岁(21～46岁)。其中卵巢EMs及(或)盆腔EMs 28例，直肠阴道隔EMs 4例，腹部切口EMs 4例，输卵管EMs3例(其中2例合并有卵巢EMs)，输尿管EMs 1例。8例合并子宫肌瘤，10例合并子宫腺肌症，4例合并有子宫内膜增殖症，2例合并宫颈癌，1例合并输卵管妊娠，1例合并对侧卵巢黏液细胞癌。

　　1.2 标本采集

　　在患者接受腹腔镜手术或开腹手术术前抽血检测CA125，术中取异位内膜病灶。常规用10%甲醛溶液固定12~ 24 h，石蜡包埋切片，HE染色后光镜下观察组织学形态，筛选组织标本。异位内膜标本以可见30个以上的腺上皮细胞为人选标准。

　　1.3 试剂和方法

　　1.3.1 试剂

　　 (1)鼠抗人survlvln单克隆抗体(Neomarker公司产品);(2) SP免疫组化试剂盒(通用型)购自福建迈新;(3) CA125检测试剂盒为美国Roche公司产品。

　　1.3.2S-P染色法

　　 以输卵管妊娠绒毛切片为阳性对照，PBS代替一抗为阴性对照，survlvln抗体使用浓度为1：200，所有切片均经过微波修复抗原。

　　1.4 结果判定

　　 Survivin可在子宫内膜腺体细胞的胞核及胞浆内表达，参照KONNO等^[２]的方法，根据阳性细胞的百分比及显色深浅进行分级评分(PI值)。阳性率评分(P)：0分< 5%，1分5%~25%，2分25~50%，3分50%~75%，4分>75%。强度评分(I)：1分为浅黄，2分为棕黄，3分为棕褐。二者乘积为最终分数，即PI值。间质的表达情况：0分为完全不着色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。

　　1.5CA125的检测

　　采用化学发光法，按说明书在E170全自动电化学发光仪(美国Roche公司)进行检测，以CA125<35. OU/mL为正常。

　　1.6 统计学方法

　　实验数据用SPSS 11.5统计软件进行分析。间质与表达强度之间相关性分析用spearman等级相关分析，PI值的比较用非参数检验。

　　2 结果

　　2.1 患者异位内膜survlvln的情况

　　 Survivin可表达于异位子宫内膜腺体及间质中，在二者的细胞核和胞浆中均可表达，但在腺体以细胞核内表达为主。见图1。

　　2.2 不同部位异位病灶都有survlvln不同程度的表达

　　 部位之间的表达情况差异没有显著性，各部位PI值具体为：卵巢6. 50±2.64，输卵管4.60±1.15，腹部切口7. 00±1.15，阴道直肠隔及输尿管5.50±1.91。

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